热点资讯
配资炒股优秀配资 乳腺上皮细胞 MCF 10A
发布日期：2024-12-16 23:31 点击次数：144
该项目位于深圳市南山区，总占地面积约3.86万平方米，总计容面积约26.3万平方米，规划用途包括商品住宅、商务公寓、商业等，出让地价款185.12亿元。中海企业发展和深圳润投将按照50%:50%的股权比例成立项目公司合作开发该项目。项目土地使用权的竞得和投资开发配资炒股优秀配资，有利于提升公司在深圳区域市场的影响力、引领力及品牌号召力，助力公司深耕深圳房地产开发市场。
如交易全部完成，公司控股子公司金瑞泓微电子将持有嘉兴康晶99.9867%的财产份额，其余0.0133%的财产份额由嘉兴康晶普通合伙人浙江金控资本管理有限公司持有。鉴于嘉兴康晶为定向投资于嘉兴金瑞泓，而嘉兴金瑞泓为公司控股子公司，从而能实质影响嘉兴康晶的经营情况。综上所述，虽然金瑞泓微电子为嘉兴康晶的有限合伙人，但依据实质重于形式原则，公司可控制嘉兴康晶，故其将被纳入公司合并报表范围。
MCF 10A细胞是一种源自1984年从一名36岁白人女性的纤维囊性乳腺中分离出的非致瘤性乳腺上皮细胞系。这些细胞具有管腔导管细胞特征，但不表现出肌上皮细胞特征，并且对胰岛素、糖皮质激素、霍乱肠毒素和表皮生长因子（EGF）有反应。
MCF 10A细胞在培养过程中表现出三维生长能力，能够在胶原蛋白基质中形成圆顶状结构，未显示终末分化或衰老迹象。这些细胞广泛用于研究正常乳腺细胞功能、乳腺癌基因功能分析以及乳腺发育中的细胞间相互作用等。
然而，关于MCF 10A细胞是否能可靠地代表正常人乳腺细胞，存在一定的争议。一些研究表明，在不同的培养条件下，MCF 10A细胞可能无法完全代表正常乳腺上皮细胞的表型，特别是在基底起源和干细胞特性方面[2]。此外，有研究指出，MCF 10A细胞在某些条件下表现出基底样表型，但与间充质癌细胞系有许多相似之处，这进一步质疑了其作为正常乳腺上皮模型的适用性[2]。
总体而言，MCF 10A细胞系因其非致瘤性和三维生长能力而成为乳腺癌研究中的重要工具，但其是否能准确反映正常乳腺上皮细胞的特性仍需谨慎评估[2]。
MCF 10A细胞在不同培养条件下的表型变化是什么？
MCF-10A细胞在不同培养条件下的表型变化主要体现在其形态和结构上的显著差异。这些变化可以通过二维培养、三维培养以及特定处理条件（如氧化应激、激素剥夺等）来观察。
在二维培养条件下，MCF-10A细胞通常形成立方上皮形态，表现出基底/肌上皮和乳头状细胞标记物的表达，如肌动蛋白、α-平滑肌肌动蛋白和N-cadherin等[2]。这些细胞具有基底起源，并且在某些条件下会表现出强CK5染色和中等水平的CK17表达[2]。
在三维培养条件下，MCF-10A细胞表现出更加复杂的形态变化。例如，在Matrigel中，MCF-10A细胞形成球状结构，而在混合Matrigel/胶原I凝胶中，细胞则生长出分支和腺泡结构[6]。这种三维培养环境使得MCF-10A细胞能够形成类似组织的结构[4]。
此外，MCF-10A细胞在不同的氧化应激条件下也会表现出显著的形态变化。例如，在长期暴露于H2O2的情况下，MCF-10A细胞变得更大且更扩展，并且在6周后开始出现转化焦点[5]。这些转化焦点与氧化微环境相关，并且表明了MCF-10A细胞在氧化应激下的表型变化[5]。
在激素剥夺条件下，MCF-10A细胞的形态也发生了显著变化。例如，在-HC/-EGF培养基中，MCF-10A细胞的转化焦点外观受到影响，显示出不同的生长特性[3]。此外，MCF-10A细胞在缺乏HC和EGF的培养基中表现出独特的纤维状细胞形态[3]。
MCF-10A细胞在不同培养条件下的表型变化包括从立方上皮形态到球状结构再到分支和腺泡结构的转变，以及在氧化应激和激素剥夺条件下的显著形态变化。
MCF 10A细胞与正常乳腺上皮细胞在基因表达和功能上的差异有哪些？
MCF10A细胞与正常乳腺上皮细胞在基因表达和功能上的差异主要体现在以下几个方面：
1.基因表达模式：
MCF10A细胞在基因表达上与原代乳腺上皮细胞（HMEC）相似，但存在一些显著差异。例如，MCF10A细胞在某些基因的表达上表现出更高的水平，如IL-1α、IL-1β、CXCL8、IL-32、CXCL1、CXCL2和CCL20[7]。这些基因的上调可能反映了MCF10A细胞在体外培养过程中发生的基因表达变化。 在与乳腺癌细胞共培养后，MCF10A细胞表现出S100A8和S100A9基因的显著增加，同时CDH1和CD24等乳腺上皮分化标志物的表达减少[8]。这表明MCF10A细胞在与癌细胞互动时，其基因表达模式会发生变化，从而影响其功能。2.干细胞/祖细胞标志物：
MCF10A细胞在不同的培养条件下表现出不同的干细胞/祖细胞标志物表达情况。例如，在3D Matrigel培养中，MCF10A细胞失去了干细胞标志物CD49f、CD44和ALDH1A3，但获得了上皮标志物CK8、CK18和CK7[2]。这表明MCF10A细胞在特定条件下可能失去干细胞特性，而获得更成熟的上皮细胞特征。3.信号通路和功能：
MCF10A细胞在RLO处理后，p53、Caspase-3、DMP1和p21的表达水平显著提高，而HER2的表达水平降低[6]。这些变化表明MCF10A细胞在受到特定化学物质刺激时，其信号通路和功能会发生调整，从而影响细胞的增殖和凋亡。 在与乳腺癌细胞共培养后，MCF10A细胞表现出多种癌症相关途径的显著失调，包括代谢途径、细胞粘附、生长因子信号传导和TP53途径[8]。这些变化可能反映了MCF10A细胞在癌环境中所经历的功能重编程。4.形态学和结构：
MCF10A细胞在共培养或三重培养中能够重现腺泡和导管样结构，显示出比单细胞培养更成熟的表型和功能[9]。然而，尽管MCF10A细胞被认为是“正常”乳腺上皮细胞系，它们在遗传学上存在异常，携带与长期体外培养相关的遗传和表观遗传异常[9]。5.核基质蛋白组成：
MCF10A细胞系及其衍生细胞表现出包含正常和乳腺癌组织中发现的核基质蛋白的表型[12]。这表明MCF10A细胞可能代表乳腺癌转化途径中的中间步骤，并且核基质蛋白的变化可能作为乳腺癌转化过程中的生物标志物。MCF10A细胞虽然常被用作正常乳腺上皮细胞的模型，但在基因表达、干细胞特性、信号通路、形态学和核基质蛋白组成等方面仍存在显著差异。
如何评估MCF 10A细胞作为乳腺癌研究模型的有效性？
评估MCF10A细胞作为乳腺癌研究模型的有效性可以从多个方面进行分析，包括其生物学特性、分子标志物表达、细胞行为以及在不同乳腺癌进展阶段的模拟能力。
MCF10A细胞系来源于良性增殖性乳腺组织，具有稳定的近二倍体核型，并经过适度的遗传修饰，如p16基因的丢失[4]。这些细胞在三维重建基底膜（rBM）培养中表现出正常乳腺组织的重要特征，如增殖、细胞周期停滞、顶端-基底侧极化和最终的凋亡，形成乳头空间[4]。这些特性使得MCF10A细胞成为研究乳腺癌恶性进展的理想模型。
MCF10A细胞能够表达乳腺癌相关基因，并且能够产生与乳腺癌相关的分子标志物[19]。例如，通过傅里叶变换红外微光谱学（µ-FT-IR）评估了质子诱导的MCF-10A乳腺细胞的生物分子变化，显示了DNA、蛋白质、脂质和碳水化合物细胞成分的不同贡献[19]。此外，通过RNA测序技术分析了MCF10A细胞系系列在三维球体培养中的基因组变化，验证了该系统作为乳腺癌进展分子准确模型的有效性[15]。
MCF10A细胞在三维培养系统中表现出高度的异质性和可变性，但它们在体外培养中表现出高度的异质性和可变性[19]。通过一系列细胞生物学和分子生物学分析方法，如SRB染色法、BrdU标记法、FITC Annexin V Apoptosis Detection Kit I等，可以详细评估MCF10A细胞的蛋白质表达、DNA合成、细胞凋亡、细胞侵袭、集落形成、肿瘤形成和细胞分化情况[18]。
MCF10A细胞系系列提供了一个独特的机会，可以在共同的细胞背景下以分子定义的方式研究恶性进展。与MCF10A细胞相比，MCF-10AT细胞在三维rBM中形成多乳头结构，而MCF-10CA1a细胞在三维rBM中形成大型高增殖细胞团，组织结构改变，没有乳头[4]。这表明预恶性细胞失去了正常的增殖控制，但保留了正常的细胞极性、细胞间和细胞基底膜粘附。完全恶性细胞失去了正常乳头形态发生的能力[4]。
研究表明，MCF10A细胞系在乳腺癌进展模型中展示了细胞增殖和迁移能力的增加，以及上皮到间质标记物的转换[14]。此外，通过CRISPR/Cas9技术敲低Mettl3基因后，MCF10A细胞系中一个候选基因的mRNA水平显著增加，而另一个候选基因的迁移能力显著下降[14]。这些结果进一步验证了MCF10A细胞系作为乳腺癌研究模型的有效性。
MCF 10A细胞在模拟乳腺发育和疾病过程中的应用有哪些？
MCF10A细胞在模拟乳腺发育和疾病过程中的应用非常广泛，主要体现在以下几个方面：
MCF10A细胞系被广泛用于研究乳腺组织的发育过程。通过构建3D模型，包括导管和腺泡结构，这些结构在培养过程中逐渐形成，从而模拟了乳腺组织的发育过程[20]。这种模型能够表达乳腺腺体标记物，并显示出乳腺腺体的发育过程[20]。
MCF10A细胞及其亚系（如MCF10AneoT、MCF10AT、MCF10DCIS和MCF10CA1）被用于研究乳腺癌的不同阶段。例如，MCF10A细胞代表正常乳腺上皮细胞，而MCF10AT细胞则通过HRAS基因转化，模拟了乳腺增生性疾病的早期阶段[22,23]。此外，MCF10CA1h和MCF10CA1a细胞分别代表乳腺癌进展的不同阶段，包括恶性肿瘤和远处转移[24]。
MCF10A细胞系也被用于研究乳腺癌细胞的信号通路。例如，通过磷酸化肽段富集和LC-MS分析，研究人员可以研究MAPK-AKT-mTOR等关键信号通路在乳腺癌中的动态变化[26]。
MCF10A细胞包含表达干细胞/祖细胞标记物的亚群，并且可以通过囊胚体培养方法来表征其自我更新能力[2]。尽管其囊胚体形成率较低，但通过分选特定标记物的亚群，可以进一步研究乳腺干细胞的特性[2]。
由于MCF10A细胞与正常人类乳腺上皮细胞具有高度相似性，它们被广泛用于毒性学研究。例如，研究双酚A及其类似物对MCF10A细胞的影响[25]。
MCF10系列细胞系在自发性异位乳腺癌和乳腺导管癌中的异质性研究中也发挥了重要作用。这些模型为乳腺癌的早期诊断、治疗和预后提供了重要工具[27]。
关于MCF 10A细胞的争议，学术界有哪些不同的观点和研究结果？
关于MCF 10A细胞的争议，学术界存在不同的观点和研究结果。以下是几个主要的研究方向和发现：
1.肿瘤形成能力：
MCF10A细胞的肿瘤形成能力：有研究表明，经过随机突变处理的MCF10A细胞（如MCF10Aβ细胞）在裸鼠体内能够形成大且持续生长的肿瘤[21]。然而，另一项研究指出，即使在免疫功能受损的小鼠中，Cd^2+处理后的MCF10A细胞也未能形成肿瘤[7]。这表明MCF10A细胞在不同条件下可能表现出不同的肿瘤形成能力。2.基因表达和基因组变化：
基因表达模式：研究发现，MCF10A细胞具有基底样基因表达模式，并且ER和PR阴性[7]。此外，MCF10A细胞在三维培养中表现出清晰的细胞间连接和基底膜沉积，但其增殖能力受到限制[4]。 基因组变化：通过Illumina Human Omni 2.5M SNP阵列数据的拷贝数分析，研究发现MCF10A细胞和MCF10CA1a细胞在基因扩增和丢失方面存在显著差异[28]。例如，MCF10A细胞系中存在2374个蛋白质编码基因的增加和461个基因的丢失，而MCF10CA1a细胞系中则有1433个基因的增加和33个基因的丢失[28]。3.药物敏感性和化疗反应：
化疗敏感性：研究表明，MCF10A和MCF10CA1a细胞系在Docetaxel/紫杉醇化疗中的敏感性相同，无论是否存在EGFR突变[28]。这表明MCF10A细胞对某些化疗药物具有一定的敏感性。4.细胞周期调控：
细胞周期调控：研究通过相位对比和荧光曝光图像分析，以及对细胞周期相关蛋白的测量，探讨了MCF10A细胞在不同静息条件下的行为。结果显示，p21蛋白水平高时，细胞周期中间时间（IMT）较长，表明p21在调控细胞周期中起重要作用[33]。5.超声成像造影剂的影响：
超声微泡对MCF10A细胞的影响：研究表明，改良后的超声微泡CNC-SonoVue对MCF10A细胞的增殖基本没有影响，说明其引入未增加细胞毒性[29,32]。关于MCF 10A细胞的争议主要集中在其肿瘤形成能力、基因表达和基因组变化、药物敏感性、细胞周期调控以及超声成像造影剂的影响等方面。
参考文献：
1. Long-term exposure of MCF-12A normal human breast epithelial cells to ethanol induces epithelial mesenchymal transition and oncogenic features. [PMID: 27035792]
2. Evaluation of MCF10A as a Reliable Model for Normal Human Mammary Epithelial Cells.[PMID: 26147507]
3. Morphologic transformation of human breast epithelial cells MCF-10A: dependence on an oxidative microenvironment and estrogen/ epidermal growth factor receptors. [PMID: 20809984]
4. Increasingly transformed MCF-10A cells have a progressively tumor-like phenotype in three-dimensional. [PMID: 19291318]
5. Role of Thioredoxin Reductase 1 in Dysplastic Transformation of Human Breast Epithelial Cells. [PMID: 27845427]
6. Biochemical characterization of ratfish (Chimaera monstrosa) liver oil; cytotoxic and antineoplastic evaluation in cancer cell lines. Int Clin Med, 2018 2(4): 1-11
7. Meta-analysis of gene expression profiling reveals novel basal gene signatures in MCF-10A cells transformed with cadmium. [PMID: 33062196]
8. S100A8/A9 mediate the reprograming of normal mammary epithelial cells induced by dynamic cell-cell interactions with adjacent breast cancer cells. [PMID: 33446797]
9. Hormone-responsive 3D multicellular culture model of human breast tissue. Xiuli Wang et al. [PMID: 22309836]
10. Role of ZNF143 and Its Association with Gene Expression Patterns, Noncoding Mutations, and the Immune System in Human Breast Cancer.[PMID: 36675976]
11. Transcription profiles of non-immortalized breast cancer cells. BioMed Central. [PMID: 16626496]
12. Role of the Nuclear Matrix in Breast Cancer. Tracy S. Replogle and Kenneth J. Pienta. [PMID: 8826645]
13. A novel MCF-10A line allowing conditional oncogene expression in 3D culture. Ricarda Herr et al. [PMID: 21752278]
14. m6A regulates breast cancer proliferation and migration through stage-dependent changes in Epithelial to Mesenchymal Transition gene expression. Mohammed G Dorgham et al. [PMID: 38023205]
15. An epithelial-mesenchymal-amoeboid transition gene signature reveals subtypes of breast cancer progression and metastasis. Amin Emad et al.
16. NRG1/ERBB3/ERBB2 Axis Triggers Anchorage-Independent Growth of Basal-like/Triple-Negative Breast Cancer Cells. [PMID: 35406375]
17. Proteome-Wide Profiling of the MCF10AT Breast Cancer Progression Model. Lee YeeChoong et al. [PMID: 20543960]
18. Nuclear Respiratory Factor 1 Acting as an Oncoprotein Drives Estrogen-Induced Breast Carcinogenesis. [PMID: 30486409]
19. Evaluation of Proton-Induced Biomolecular Changes in MCF-10ABreast Cells by Means of FT-IR Microspectroscopy. Valerio Ricciardi Appl et al. Sci. 2022, 12, 5074
20. Perturbation-expression analysis identifies RUNX1 as a regulator of human mammary stem cell differentiation. Sokol ES et al. [PMID: 25894653]
21. Transformation of MCF-10A cells by random mutagenesis with frameshift mutagen ICR191: a model for identifying candidate breast-tumor suppressors. [PMID: 18534021]
22. Regulation of miRNA-29c and its downstream pathways in preneoplastic progression of triple-negative breast cancer.[PMID: 28160548]
23. Molecular, Cellular, and Technical Aspects of Breast Cancer Cell Lines as a Foundational Tool in Cancer Research.[PMID: 38137912]
24. 1α,25-dihydroxyvitamin D inhibits de novo fatty acid synthesis and lipid accumulation in metastatic breast cancer cells through down-regulation of pyruvate carboxylase. [ PMID: 27936456]
25. Transcriptome analysis of human mammary epithelial cells treated with bisphenol A and bisphenol A analogue mixtures reveals major alterations in multiple cellular pathways. Robin Mesnage et al.
26. Capturing the signalling dynamics of the MAPK-AKT-mTOR pathway in a single targeted phosphoproteomics assay. Donna O. Debets et al.
27. Nontransgenic models of breast cancer. Gloria H Heppner et al. [PMID: 11250725]
28. Using the MCF10A/MCF10CA1a Breast Cancer Progression Cell Line Model to Investigate the Effect of Active, Mutant Forms of EGFR in Breast Cancer Development and Treatment Using Gefitinib. [PMID: 25969993]
29. 第一届全国超声医学青年学术论坛暨2023年深圳市超声医学学术年会论文汇编. 中华医学会等. [2023-04-20]
30. AACR Annual Meeting 2024
31. Chromatin interaction analysis reveals changes in small chromosome and telomere clustering between epithelial and breast cancer cells. [PMID: 26415882]
32. 第二十三次全国超声医学学术会议论文汇编. 中华医学会等. [2023-10-31]
33. Spontaneously slow-cycling subpopulations of human cells originate from activation of stress-response pathways. [PMID: 30865623]
34. PFOS induces proliferation, cell-cycle progression, and malignant phenotype in human breast epithelial cells.[PMID: 27035792]
35. Programa de Pós-Graduação em Ciências Biológicas. Universidade de São Paulo et al.配资炒股优秀配资
乳腺癌and细胞基因乳腺发布于：广东省声明：该文观点仅代表作者本人，搜狐号系信息发布平台，搜狐仅提供信息存储空间服务。